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  • 一种锌指核酸酶介导的猪MSTN基因突变序列及其应用

    精品 C12N15/11

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    本发明公开了一种锌指核酸酶介导的猪MSTN基因突变序列及其应用。本发明利用锌指核酸酶技术介导猪的肌肉生成抑制素MSTN基因发生碱基缺失,造成移码突变,导致翻译提前终止无法形成MSTN功能蛋白,并获得了MSTN基因第3782‑3796位核苷酸缺失且第3800位核苷酸分子由T突变为G的突变序列。通过试验证明:MSTN基因第3782‑3796位核苷酸缺失且第3800位核苷酸分子由T突变为G的猪表现明显的双肌表型,肌肉量和瘦肉率都显著增加,脂肪含量明显降低。

  • 一种猪链球菌间接血凝检测试剂盒及其应用

    精品 G01N33/86

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    本发明提供一种猪链球菌间接血凝检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括猪链球菌间接血凝抗原,所述猪链球菌间接血凝抗原由猪链球菌CCTCC M 2016028的全菌蛋白和醛化‑鞣酸化绵羊红细胞组成。本发明的试剂盒操作简单、方便快速,无需特殊设备和仪器,全程在2~3小时内完成,适合在基层推广应用,可广泛应用于猪链球菌病流行病学的调查研究。结果的重复性好,稳定,可靠,能够准确的检测猪链球菌的抗体。

  • 一种废水微藻加工饲料的方法

    精品 A23K10/18

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    本发明公开了一种废水微藻加工饲料的方法。该方法是将废水培养、收集、沉淀的微藻与玉米皮、枯草芽孢杆菌混匀后,在地面上堆积有氧发酵,利用发酵过程中产生的高温充分杀灭病菌;降温后有氧发酵的微藻物料再与生猪全价配合饲料混合,混合过程中添加植物乳杆菌和长柄木霉,调节水分含量至40‑50%,进行厌氧发酵至pH 3.5‑5.0时取出饲喂生猪。本发明提高了废水的利用率,降低了微藻的干燥费用,杀灭废水中的病原菌,提高了微藻利用的生物安全性,促进了微藻的饲料化利用。该废水微藻加工的饲料的有益菌含量升高,生猪的生产性能提高。

  • 一种猪ICSI操作的方法

    精品 C12N5/076

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    本发明公开了一种猪ICSI操作的方法。本发明的方法包括如下步骤:(1)用脂酶或脂酶溶液水解离体动物精液的精子,收集水解产物,得到用于制备ICSI受精卵的精子。(2)将所述用于制备ICSI受精卵的精子注射到离体卵母细胞中,得到ICSI卵;(3)将所述ICSI卵进行电激活、培养,得到ICSI受精卵。该发明的方法不仅避免了因为加PVP而对猪精子的解聚、雄原核的形成以及后期的发育所造成的不良影响,而且对猪精子的质膜、顶体等区域造成破坏,有助于行ICSI操作后猪精子释放促卵母细胞活化因子,增加雄原核的形成率、受精后胚胎的囊胚形成率。

  • 免疫兔血清中猪圆环病毒PCV2抗体水平间接Elisa检测试剂盒及其检测方法和应用

    精品 G01N33/96

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    本发明提供免疫兔血清中猪圆环病毒PCV2抗体水平间接Elisa检测试剂盒,所述试剂盒以PCV2病毒基因组开放阅读框ORF2编码的重组蛋白为包被抗原。本发明还提供其检测方法和应用。本发明的检测免疫兔血清PCV2抗体水平的间接ELISA方法可以用于充分评价免疫兔血清中针对PCV2的抗体水平。

  • 猪H11位点的DNA片段及其应用

    精品 C12N15/11

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    本发明提供了猪H11位点的DNA片段及其应用。上述的猪H11位点的DNA片段的序列如序列表中的序列1所示,该位点可用于构建猪定点突变库。在该位点插入基因安全性高,无基因沉默效应,具有广谱的细胞表达活性。在猪的基因组中定位H11这样安全有效的基因修饰位点,通过在细胞或个体水平上对猪H11基因进行敲除或修饰,以构建猪H11基因突变库,可为培育优良品系的猪提供前期技术支持。

  • 猪圆环病毒2型抗原捕获ELISA试剂盒

    精品 C12N5/20

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    本发明公开了一种猪圆环病毒2型抗原捕获ELISA试剂盒。所述试剂盒中包括酶标记的由保藏编号为CGMCC NO.10205的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体。本发明还公开了利用所述单克隆抗体建立的一种快速检测猪圆环病毒2型的捕获ELISA方法,其以抗猪圆环病毒2型多抗和抗猪圆环病毒2型Cap蛋白的单抗分别作为捕获抗体和检测抗体。该方法可以检测多种基因型PCV2毒株,检测敏感性为400TCID50/ml,与其它常见猪病毒无交叉反应,且与毒价测定方法符合率为88%。结果表明,该方法具有操作简单,特异性好,敏感性高,耗时短等优点,可以用于估测病毒毒价,方便快捷地控制PCV2灭活疫苗半成品的质量。

  • 一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法

    精品 C12N15/11

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    本发明提供了一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法,该包括以下步骤:1)设计被敲除基因的5’端同源臂和3’端同源臂以及相应的通用引物;2)将上述同源臂、通用引物和欲插入的基因引入到载体中,得到打靶载体;3)转染细胞;4)PCR扩增鉴定插入结果。本发明主要是依托猪H11位点切割系统设计打靶载体,该载体它能够将外源基因精确的引入到猪的H11位点中,以解决传统打靶技术效率低下,PCR检测引物不便设计,检测难度大的问题。本发明提供的定点插入方法能让外源基因稳定在H11表达,为猪转基因搭建了稳定的平台。

  • 一种“仿比利时蓝牛”MSTN基因型的基因编辑猪的制备方法

    精品 C12N5/073

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    本发明公开了一种“仿比利时蓝牛”MSTN基因型的基因编辑猪的制备方法。本发明提供的方法,为对目的猪基因组的MSTN基因外显子3中的靶点区域进行基因组编辑,使外显子3提前形成终止密码子而终止表达,得到“仿比利时蓝牛”MSTN基因型的基因编辑猪。本发明的方法制备的“仿比利时蓝牛”MSTN基因型的基因编辑猪相对于其它突变类型(不形成移码突变或不形成提前终止密码子)的基因编辑而言,可以提前形成终止密码子,对于MSTN基因的修饰更为有效。

  • 一种精炼猪油的制备方法

    精品 C11B3/04

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    本发明公开了一种精炼猪油的制备方法,其特征在于,将未经过加工的猪油经过脱胶、脱色、脱臭、冷却、调配、激冷及捏合步骤操作,对猪油进行制备。脱胶步骤中,将猪油加热至50-60℃后,与200±50ppm的磷酸一起混合后放入体内温度为65-70℃的第一罐体内,持续100±5min;脱色步骤中,向脱胶后的猪油内加入6%-8%的白土,并置于真空度为40-80Torr的环境下持续30±5min后,再使用过滤机把白土过滤掉。本发明的有益效果为:制备后的猪油酸值和过氧化值均达到较低的水平;制备后的猪油稳定性较好;此制备方法,能够进行连续的工业化生产,降低了生产成本。

  • 稳定表达猪瘟病毒E0-E1-E2蛋白的重组BHK细胞系及其在制备猪瘟疫苗与诊断试剂中的应用

    精品 A61K39/187

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    本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒E0-E1-E2蛋白的重组细胞系及其在制备猪瘟疫苗与诊断试剂中的应用。其中,所述表达猪瘟病毒E0-E1-E2蛋白的重组细胞系为BCSFV-E012,该细胞系保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为:CGMCC?No.7720。此外,本发明还公开了稳定表达猪瘟病毒E0-E1-E2蛋白细胞系的建立方法以及使用所述细胞系制备预防猪瘟的疫苗组合物的方法,进一步的,本发明还公开了所述重组细胞系表达的E0-E1-E2蛋白在制备预防猪瘟的疫苗及诊断试剂中的应用。采用本发明所述的重组细胞系制备得到的猪瘟疫苗安全性高,免疫效果好,容易大规模生产,不易受外源病毒污染或抗体影响,而且不产生猪瘟病毒非结构蛋白抗体,因此可以对疫苗免疫与病毒感染动物进行鉴别。

  • 猪流行性腹泻病毒RT-PCR鉴别诊断试剂盒及其应用

    精品 C12Q1/70

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    本发明公开一种猪流行性腹泻病毒RT-PCR鉴别诊断试剂盒,所述试剂盒包含:针对PEDV弱毒疫苗株ORF3基因第245~294位核苷酸序列缺失区设计的一对引物,该对引物的上下游引物分别位于所述ORF3基因缺失区两端的保守区。本发明基于ORF3基因的猪流行性腹泻病毒RT-PCR鉴别诊断试剂盒,具有特异性强、灵敏性高的特点,不仅能快速检测出仔猪腹泻样品中是否存在PEDV,而且还能快速、准确地区分自然感染野毒株和弱毒疫苗毒株,对于猪流行性腹泻病的早期快速诊断和防控具有重要意义。