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  • SCD基因敲除的猪胎儿成纤维细胞系及其构建方法

    精品 C12N15/113

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    本发明提供SCD基因敲除的猪胎儿成纤维细胞系及其构建方法。利用CRISPR/Cas9系统编辑猪SCD基因,打靶位点位于SCD基因第二外显子,可以有效地敲除SCD基因,得到SCD基因敲除猪胎儿成纤维细胞,该敲除细胞可用于制备SCD基因敲除猪以及深入研究SCD基因对猪脂肪沉积的影响,为阐明猪脂肪代谢机制提供理论基础,亦为提高猪肉产量提供分子依据。

  • 非洲猪瘟多基因联合缺失减毒株的构建及作为疫苗的应用

    精品 C12N7/00

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    本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒及疫苗。本发明首先发现了ASFV MGF‑110‑9L基因和ASFV MGF‑505‑7R基因具有较强的免疫抑制效果,在非洲猪瘟病毒上敲除上述基因能够减弱非洲猪瘟病毒的毒力,是制备减毒猪瘟疫苗的新靶标基因;采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFV CN/GS/2018中联合缺失ASFV G‑ACD‑00190基因、ASFV MGF‑110‑9L基因、ASFV G‑ACD‑00210基因和ASFV MGF‑505‑7R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。

  • 用于pAPN基因第736位和第738位氨基酸同时修饰的组合物及其应用

    精品 C12N15/113

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    本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种用于pAPN基因第736位和第738位氨基酸同时修饰的组合物及其应用。本发明提供特异性识别猪pAPN基因的成套sgRNA可以靶向识别pAPN基因第736位和第738位氨基酸附近的序列,特异性强。在此基础上,结合切割蛋白和双链donor序列组成的组合物,可以实现pAPN基因第736位和第738位氨基酸同时修饰。在该组合物的编辑下,pAPN基因第736位和第738位氨基酸得到精准有效修饰,能够避免破坏或改变pAPN基因的其余氨基酸的正常表达。因此其不仅可以抵抗TGEV感染,并能在最大程度上保留pAPN蛋白生理活性功能。

  • 一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用

    精品 C07K14/01

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    本发明提供了一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ IDNO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进ASFV致敏免疫细胞增殖,并且能够通过促进猪单核巨噬细胞及B、T淋巴细胞分泌IFN‑γ促进猪机体产生ASFV抗原特异性免疫应答。免疫动物后,能显著促进猪机体免疫应答。本发明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能够用于制备非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗。

  • 一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用

    精品 C07K14/01

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    本发明提供了一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进ASFV致敏免疫细胞增殖,并且能够通过促进猪单核巨噬细胞及B、T淋巴细胞分泌IFN‑γ促进猪机体产生ASFV抗原特异性免疫应答。免疫动物后,能显著促进猪机体免疫应答。本发明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能够用于制备非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗。

  • ML-60218在制备用于治疗非洲猪瘟的药物中的新用途

    精品 A61K31/4155

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    本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域,具体涉及ML‑60218用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明意外发现,ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒蛋白p30的表达,阻止病毒入侵宿主细胞,可用于抑制ASFV的早期感染;并且ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒的复制,降低非洲猪瘟病毒感染后的病毒滴度,可作为非洲猪瘟病毒的抑制剂,用于预防或治疗非洲猪瘟。

  • ASFV检测试剂盒及其引物探针组合物与应用

    精品 C12Q1/70

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    本发明公开了ASFV检测试剂盒及其引物探针组合物与应用。本发明具体地公开了一种用于检测非洲猪瘟病毒的试剂盒,所述试剂盒包含引物ASF‑RPA‑F1和引物ASF‑RPA‑R1或引物ASF‑RPA‑R2,还包含SEQ ID No.4‑29所示的至少任一种p17‑crRNA以及探针FAM‑N‑BHQ2。本发明建立的快速、精准、可视化且低成本的非洲猪瘟病毒的检测方法结合了RPA技术与Cas12a酶切技术,可以高效、灵敏、特异、精准地判定待测样品中是否含有非洲猪瘟病毒,为严格控制ASFV的传播提供了强有力的检测工具,具有重要的经济效益与社会价值。

  • 一种杂交瘤细胞株、A型流感病毒核蛋白单克隆抗体及其应用

    精品 C12N5/20

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    本发明提供了一种杂交瘤细胞株、A型流感病毒核蛋白单克隆抗体及其应用,属于猪流感病毒检测技术领域。本发明提供了一种能够分泌A型流感病毒核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2021165。本发明杂交瘤细胞株分泌获得的A型流感病毒单克隆抗体具有特异性好、效价高等优点,可用于鉴定待测病毒是否为A型流感病毒,鉴定待测标本是否感染A流感病毒以及待测血清中是否含有A型流感病毒的抗体。IFA检测结果显示本发明稳定分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株可与H1N1、H1N2、H3N2、H5N1、H7N9和H9N2亚型流感病毒发生特异性反应,具有广谱生物学活性。

  • ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用

    精品 A61K31/7105

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    本发明涉及ssc‑miR‑122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用,属于抗病毒药物技术领域。本发明提供了ssc‑miR‑122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用,所述ssc‑miR‑122的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明为研究抗PRRSV病毒复制的药物提供了新的靶标,为进一步开发新的抗病毒策略奠定了基础,也为PRRSV感染后宿主抗病毒机制研究提供了候选miRNA。

  • 一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用

    精品 C07K14/01

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    本发明提供了一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进ASFV致敏免疫细胞增殖,并且能够通过促进猪单核巨噬细胞及B、T淋巴细胞分泌IFN‑γ促进猪机体产生ASFV抗原特异性免疫应答。免疫动物后,能显著促进猪机体免疫应答。本发明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能够用于制备非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗。

  • 识别PCV2病毒样颗粒的单克隆抗体及其在定性及定量检测PCV2病毒样颗粒中的应用

    精品 C12N5/20

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    本发明公开了一种识别PCV2病毒样颗粒的单克隆抗体及其在定性及定量检测PCV2病毒样颗粒中的应用。其中,能够特异性识别猪圆环病毒2型病毒样颗粒的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.15793的杂交瘤细胞株分泌产生。通过间接免疫荧光实验鉴定所得到的单克隆抗体3H9的特异性,结果表明该单克隆抗体可以特异性识别PCV2病毒粒子,并且能够与PCV2 VLPs反应,而不与线性cap蛋白包被的ELISA板反应。因此,本发明建立了一种可以同时定性和定量分析PCV2 VLPs的简便方法,解决了PCV2 VLP粒子结构检测仪器昂贵,操作困难以及定量方法不能区分非特异性蛋白和破碎亚基的问题。

  • 猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗及其制备方法和应用

    精品 C12N15/62

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    本发明公开了一种猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗及其制备方法和应用。所述的猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗中含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经原核表达系统表达得到的可溶性猪口蹄疫病毒O型Fc多肽。本发明通过对已经公开的编码猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原的核苷酸序列进行了密码子优化,然后通过重新构建重组质粒、优化诱导及培养条件,实现了靶标蛋白的可溶性表达及纯化。可溶性蛋白最大程度模拟了天然抗原的特性,免疫原性更强,抗体水平更高。此外,本发明制备得到的疫苗成份更为简单,不含3D蛋白成份,降低了疫苗总蛋白含量,在提高免疫效力的同时降低了疫苗成本。本发明的提出对我国猪O型口蹄疫防控提供了物质储备和技术支撑,具有重要的意义。