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  • 绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒及其拯救方法和应用

    精品 C12N7/01

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    本发明公开了绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒及其拯救方法和应用。本发明将绿色荧光蛋白编码基因插入到猪瘟病毒感染性克隆Npro蛋白编码区的第13位与第14位氨基酸之间,通过转染PK-15细胞、传代,拯救出可视化的绿色荧光蛋白标记的重组猪瘟病毒。所述重组猪瘟病毒的生长特性与其亲本病毒一致,感染PK-15细胞后通过荧光显微镜直接可视,用其建立的改进中和试验方法(EGFP-NT)能够借助荧光显微镜直接观察猪瘟病毒的存在与否并确定待检血清中的中和抗体效价,无需额外的免疫荧光试验步骤,其特异性和敏感性与传统的中和免疫荧光试验一致,却更加方便快捷,可替代中和免疫荧光试验方法用于猪瘟血清学检测和流行病学调查。

  • Asia1型口蹄疫重组病毒及其制备方法和应用

    精品 C12N7/01

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    本发明涉及一种对宿主无致病性的Asia1型口蹄疫重组病毒及其制备方法和应用,拯救系统为基因工程构建的能够表达精确口蹄疫病毒基因组RNA的高效真核质粒,借此能够构建和制备口蹄疫重组病毒,使用上述质粒可以制备出高滴度和抗原匹配性好的疫苗株,既可以做为活疫苗,也可以制备成灭活苗,免疫猪和牛后可有效刺激机体产生免疫应答,并提供猪和牛体免疫保护作用,能够有效保护GV和GII流行毒株,免疫保护率能达100%,半数保护剂量(PD50)在6.34~13.59,具有效价高、与流行毒株的抗原匹配性高、抗原谱广、免疫保护率高、对宿主猪和牛无致病力,且不形成血毒症,不排毒的优点,可用于我国及其周边国家Asia1型口蹄疫病毒的预防和控制。

  • 一种应用MLANA基因的SNP鉴定五指山小型猪近交系的方法

    精品 C12Q1/68

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    本发明公开了一种应用MLANA基因的SNP鉴定五指山小型猪近交系的方法。本发明提供了一种辅助鉴定待测猪群体是否为五指山小型猪近交系群体的方法,包括如下步骤:从待测猪群体中随机抽样得到待测样本,然后检测待测样本基于MLANA基因上的序列表的序列1自5’末端第206位核苷酸的基因型,如果所有待测样本均为杂合型、待测猪群体为候选的五指山小型猪近交系群体,如果所有待测样本中存在一个以上纯合型、待测猪群体为候选的非五指山小型猪近交系群体。本发明对于五指山小型猪近交系的种质资源鉴定具有重大价值。

  • 一种用于抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的RNAi及其制备方法

    精品 C12N15/113

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    一种用于抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的RNAi及其制备方法,所述包含siRNA序列、shRNA慢病毒表达载体构建、复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染Marc-145细胞(绿猴肾细胞)以及抑制PRRSV复制效果的验证方法,该序列具有明显抑制PRRSV在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索,构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术,有望构建靶向猪繁殖与呼吸综合征病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据,为动物的抗病育种提供前期准备。

  • 猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原及其应用

    精品 C07K19/00

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    本发明公开了一种猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原及其应用,属于生物疫苗领域。本发明采用“抗原化抗体”策略,将猪口蹄疫病毒O型的多个毒株的主要抗原表位进行合理串联后,与猪IgG重链恒定区偶联构建得到一种猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原,经Bio-Rad蛋白定量试剂盒定量后与重组口蹄疫病毒3D蛋白配伍制备疫苗,动物免疫试验结果显示,该疫苗单独使用或与重组口蹄疫病毒3D蛋白配伍后都能够刺激机体产生高效价的保护性抗体,抗体水平高于国家标准,具有良好的应用前景。

  • 一种猪骨高汤、猪骨油与猪骨素联产的方法

    精品 A23L1/313

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    本发明公开了一种猪骨高汤、猪骨油与猪骨素联产的方法。该方法是骨经破碎、热压抽提、振动除渣、静置分离得到猪骨抽提物,将猪骨抽提物浓缩至固形物含量为40%后按浓缩物质量添加12.8%食用盐调,经高压均质乳化后得到猪骨高汤成品。用管式分离机将猪骨抽提物进行油水连续分离,得到猪骨油和猪骨素原液,猪骨油经水洗、除水后得到成品猪骨油。将猪骨素原液浓缩至固形物含量为45%,按浓缩物质量添加13%食用盐,调和均匀得到猪骨素成品。本发明原料来源广泛,在工艺上实现了多产品联产,所生产的猪骨高汤、猪骨油、猪骨素味道鲜美,营养价值丰富,广泛用于食品工业、餐饮业和家庭厨房,市场前景广阔。

  • 养殖场多级组合除臭降氨杀菌系统和方法

    精品 B01D53/58

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    本发明属于养殖场设备技术领域,具体涉及养殖场多级组合除臭降氨杀菌系统和方法。本发明的多级组合除臭降氨杀菌系统包括:箱体、第一级湿帘装置、第二级湿帘装置、第三级微生物菌液喷淋装置和光催化装置;箱体包括依次连通的第一腔室、第二腔室和第三腔室;第一级湿帘装置设于第一腔室内,第二级湿帘装置设于第二腔室内,第三级微生物菌液喷淋装置和光催化装置设于第三腔室内。本发明通过第一级湿帘装置、第二级湿帘装置、微生物菌液喷淋装置和光催化装置依次对圈舍或畜禽粪便贮存、处理等养殖场设施排出的气体进行酸洗、碱洗、生物吸附降解和光催化工艺处理,实现圈舍或畜禽粪便贮存、处理设施废气高效除臭降氨除菌,最大程度阻断疫病的传播。

  • 一种复合微生物除臭菌剂及其制备方法和应用

    精品 C12N1/20

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    本发明提供了一种复合微生物除臭菌剂及其制备方法和应用,属于微生物除臭技术领域,所述复合微生物除臭菌剂包括长孢洛德酵母、玉米乳杆菌、植物乳杆菌和副干酪乳杆菌,所述长孢洛德酵母、玉米乳杆菌、植物乳杆菌和副干酪乳杆菌的活菌总数为130~170亿/mL。本发明提供的复合微生物除臭菌剂不但能对畜禽圈舍和粪水除臭,而且微生物无毒、无污染,对环境、人体、畜禽、植物和土壤友好,不产生危害,能有效预防畜禽圈舍内的蚊蝇滋生,可为畜禽提供更好的福利化养殖环境。

  • 一种不同豆天蛾地理种群之间杂交的方法

    精品 A01K67/033

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    本发明公开了资源昆虫人工养殖领域方面因常年人工养殖而导致种群退化的一种解决方法,此方法通过不同豆天蛾地理种群之间杂交从而使得豆天蛾江苏种群得到改良。通过比较3个不同豆天蛾地理种群之间不同虫态表观性状差异以及化蛹率、羽化率、蛹期和雌成虫寿命等指标,而后将河南种群和湖北种群对江苏种群按雌×雄和雄×雌以数量比1:1的比例进行交配,比较交配后雌虫产卵量、子代卵孵化率、幼虫各龄期存活率。最终得到河南♀×江苏♂组合是对江苏种群后代改良的最优路线。本发明所公开的方法为江苏地区豆天蛾产业提供了新的方向与思路,使得人工养殖导致的种群退化问题得以解决,对豆天蛾养殖产业健康良好发展具有重要意义。

  • 饲料中二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶和二甲氧甲基苄氨嘧啶的检测方法

    精品 G01N30/88

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    本发明公开了一种饲料中二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶和二甲氧甲基苄氨嘧啶的检测方法,使用混合酸性流动相进行洗脱,使二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶和二甲氧甲基苄氨嘧啶在色谱柱上分离,进行串联质谱检测。本发明使用的混合酸性流动相等度洗脱,同时使二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶和二甲氧甲基苄氨嘧啶在C18色谱柱上分离,采用串联三重四极杆质谱作为检测器,满足一次性同时定性、定量检测饲料样品中多种抗菌增效剂的要求,样品前处理简单,检测结果准确可靠。具体可参见实施例中的实验分析。

  • 胃毒性杀虫剂或转基因杀虫蛋白对龟纹瓢虫毒性影响的测定方法

    精品 G01N33/00

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    本发明提供了一种简单灵敏的检测胃毒性杀虫剂或转基因杀虫蛋白对龟纹瓢虫直接毒性影响的测定方法。该方法通过把杀虫剂或转基因杀虫蛋白均匀地混入所建立的以花粉为基础的饲料直接饲喂给龟纹瓢虫,并以混入蛋白酶抑制剂E-64的饲料(225μg E-64/g花粉)为阳性对照,以没有混入任何杀虫化合物的饲料为阴性对照,通过比较处理组和对照组瓢虫生存率、发育历期、体重和产卵量等重要生命指标评价杀虫化合物的潜在毒性。采用本方法测定了龟纹瓢虫对不同浓度E-64的生物学反应,龟纹瓢虫的不同生命参数随E-64浓度的变化显示出明显的剂量-效应关系,证明了该方法的有效性和灵敏性。

  • 玉米推茬清垄旋耕播种方法

    精品 A01B79/02

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    本发明提供一种玉米推茬清垄旋耕播种方法,属于农作物栽培技术领域。其特征是在前茬秸秆堆积的地块,播种带的行内进行推茬清垄、深层施肥、单粒精量播种,并配合喷水和喷药,在播种带之间进行深旋松土和秸秆覆盖等多项作业过程,通过机械一次性完成。其推茬清垄技术是在苗带处将前茬的秸秆进行切断、粉碎,并将其推出播种带,滞留在非播种带处,同时进行10cm左右深度的浅旋,形成播种带无秸秆或少秸秆,地表土壤疏松的苗带。推茬清垄后并配合深旋松土、深层施肥、精量播种等技术,形成了一种轻简化、低耗能玉米高产高效的种植方法,可有效解决前茬秸秆堆积、播种质量差、耕层浅犁底层坚实和群体整齐度低等玉米生产难题。