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  • BRCA1、JAML及其调控基因在品种选育中的应用

    精品 C12Q1/6888

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    本发明涉及BRCA1、JAML及其调控基因在品种选育中的应用,具体的涉及BRCA1、JAML及XLOC_011001在选育高肌肉品质畜禽品种中应用。发明发现了与猪肉肌内脂肪相关的BRCA1基因和JAML基因,进一步分析显示XLOC_011001是调控上述2个基因表达的lncRNA。本发明发现了调控猪肌内脂肪沉积的分子标志物,并进一步研究他们的相互作用关系,结果显示这些分子标志物可用于选育高肉品质畜禽品种,在畜牧业育种中具有很好的应用前景。

  • 敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系的构建方法及其应用

    精品 C12N5/10

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    本发明涉及生物技术领域,具体涉及敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系的构建方法及其应用。该猪肺泡巨噬细胞系的保藏编号为:CCTCC NO:C2019174。敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系的构建方法:将含有sgRNA的重组慢病毒转染猪肺泡巨噬细胞,经抗性筛选得到所述TLR4基因敲低的猪肺泡巨噬细胞系;所述sgRNA由SEQ ID NO.1~2所示核苷酸序列退火得到。本发明构建的敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系可以促进口蹄疫病毒复制,与未敲低的细胞系相比,该敲低TLR4基因猪肺泡巨噬细胞系中口蹄疫病毒复制量是前者的2~3倍。

  • 一种构建永生化猪肝星状细胞系的方法、永生化猪肝星状细胞系和应用

    精品 C12N15/867

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    本发明提供一种构建永生化猪肝星状细胞系的方法、永生化猪肝星状细胞系和应用,涉及永生化细胞技术领域,本发明所述方法从猪肝脏中分离得到正常的猪肝星状细胞,以SV40LT过表达慢病毒转染,得到永生化的猪肝星状细胞系。本发明采用包含SV40LT序列的慢病毒载体对猪肝星状细胞进行永生化,具有可感染非分裂期细胞、容纳外源性基因片段大,可长期表达等优点。本发明所述方法构建的永生化猪肝星状细胞系呈伸展状态生长,有伪足,细胞轮廓清晰,细胞完整,具有与原代猪肝星状细胞类似的典型形态学特征;所得永生化猪肝星状细胞系传代10代后,细胞形态和特征与第1代细胞无明显差别,该构建的永生化猪肝星状细胞系可在药物筛选中应用。

  • 基于MEG3基因检测猪达100kg体重日龄的分子标记及应用

    精品 C12Q1/6888

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    本发明公开了一种基于MEG3基因检测猪达100kg体重日龄的分子标记及其应用。利用本发明的分子标记检测猪达100kg体重日龄的方法为如下(1)或(2):(1)是检测猪个体的MEG3基因第二外显子的第460位脱氧核糖核苷酸是T还是A还是T和A;(2)检测猪个体的MEG3基因第二外显子的第847位脱氧核糖核苷酸是A还是G还是A和G。通过实验证明:本发明的方法与猪达100kg体重日龄的实际测定结果一致,对选择优良猪种有重要意义。

  • 非洲猪瘟病毒强弱毒荧光定量PCR鉴别诊断试剂盒

    精品 C12Q1/70

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    本发明基于ASFV的P72基因、MGF基因和CD2V基因序列,设计合成了针对该三个基因的特异性引物与探针,建立了ASFV强弱毒的鉴别诊断方法并进行了临床和实验样品的检测,因而本发明提供含有所述引物和探针的非洲猪瘟病毒强弱毒荧光定量PCR鉴别诊断试剂盒。采用该试剂盒适应于ASFV强弱毒的鉴别诊断。

  • 口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途

    精品 C12N7/04

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    本发明公开了口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途。本发明发现,FMDV IRES结构域4的K区环上的一个胞嘧啶突变为鸟嘌呤或腺嘌呤可获得温度敏感减毒株,该突变株具有高度的遗传稳定性,接种猪能够诱导产生高水平的O型FMDV中和抗体、并能够完全抵抗当前优势流行的O型不同基因型FMDV异源毒株的攻击,而且具有良好的安全性。本发明还发现,IRES C351是所有血清型FMDV毒株温度敏感减毒表型的分子决定因素。本发明提供的口蹄疫病毒温度敏感减毒突变株及其全长cDNA感染性克隆、IRES突变体或嵌合IRES序列,可用于制备口蹄疫减毒活疫苗、作为口蹄疫灭活疫苗生产用种毒、或用于制备口蹄疫RNA疫苗。

  • 一种提高猪体细胞核移植效率的方法

    精品 C12N15/877

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    本发明公开了一种提高猪体细胞核移植效率的方法。本发明提供了一种构胚胎培养液,其中含有50nM BIX‑01294和0.5nM毛壳素。所述胚胎培养液可以用来培养重构胚胎和/或制备用于培养重构胚胎的试剂盒。本发明通过在PZM‑3培养液中添加一定浓度的BIX‑01294和毛壳素联合处理早期克隆胚胎,能显著提高克隆胚胎的囊胚率和囊胚细胞数,显著提高猪克隆胚胎的发育效率,比单独使用BIX‑01294或者毛壳素处理的效果更好,本发明对提高猪体细胞核移植技术的整体效率有重要意义。

  • 猪圆环病毒2型/猪鼻支原体组合疫苗

    精品 A61K39/295

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    本发明涉及一种多价免疫原性组合物,其包含猪圆环病毒2型(PCV2)抗原和猪鼻支原体抗原,该组合物能够抵抗猪圆环病毒2型和猪鼻支原体的攻击,不管是临床病理还是解剖病理免疫组与健康对照组无显著差异,而攻毒对照组却出现了显著的临床病理和解剖病理。并且猪鼻支原体能够促进猪圆环病毒2型抗体的滴度,为猪圆环病毒相关疾病的综合防控起到了促进作用。

  • 一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基及其制备方法和应用

    精品 C12N1/20

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    本发明公开了一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基,每1000ml培养基中包括有以下组分:PPLO肉汤10.5 g、脑心浸出液8.0 g、氯化钠4.0 g、硫酸镁0.05 g、氯化钾0.2 g、氯化钙0.09 g、磷酸氢二钠0.024 g、磷酸二氢钾0.03 g、葡萄糖5.0 g、水解乳蛋白5.0 g、25%新鲜酵母浸出液60 ml、无菌猪血清100 ml、无菌马血清100 ml、氨苄青霉素100 mg、10%醋酸铊1 ml;并提供了其制备方法及应用。本发明的有益效果为:本发明提供的一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基及其制备方法和应用,与现有技术相比,具有生长迅速和滴度高的特点,分离出牛鼻支原体的成功率高。

  • 一种快速显色一步法检测猪细小病毒的LAMP试剂盒

    精品 C12Q1/70

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    本发明提供一种快速显色一步法检测猪细小病毒的LAMP试剂盒,该试剂盒包含有6条LAMP引物的LAMP反应液构成的检测体系。本发明的试剂盒在不延长原有1小时反应时间的条件下,实现了将荧光染料直接加入反应管的一步操作,不仅简化了操作程序,解决了含有钙黄素的预混染料对Bst DNA扩增酶的抑制而导致在反应管直接加入荧光染料不显色的根本问题,还有效避免了由于反应结束后二次开盖导致的释放产物形成气溶胶的污染发生。应用本发明的试剂盒进行检测,能够肉眼直接直观判断,具有良好的特异性、敏感性和稳定性。

  • 猪带绦虫TsSerpin B6重组蛋白及其应用

    精品 C07K14/81

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    本发明提供猪带绦虫TsSerpin B6重组蛋白及其应用,尤其涉及猪带绦虫TsSerpin B6重组蛋白作为猪囊尾蚴病检测抗原的应用和猪带绦虫TsSerpin B6重组蛋白在制备猪囊尾蚴病检测试剂盒中的应用。本发明的猪带绦虫TsSerpin B6重组蛋白能够特异性诊断猪囊尾蚴病,而与猪细颈囊尾蚴、旋毛虫等寄生虫病无任何交叉反应。

  • 检测非洲猪瘟病毒的PCR引物、试剂盒及其应用

    精品 C12Q1/70

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    本发明公开了检测非洲猪瘟病毒的PCR引物、试剂盒及其应用,属于非洲猪瘟病毒的检测领域。本发明首先根据GenBank上ASFV p72基因的保守区域设计了4对引物,从中筛选出特异性强、敏感性高的引物,该引物由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成。本发明进一步公开了用所述引物制备得到的检测非洲猪瘟病毒的试剂盒并建立了相应的PCR检测方法,本发明建立的检测方法比OIE推荐的两种非洲猪瘟病毒PCR检测方法更特异、更敏感;临床样品检测结果表明本发明PCR检测方法操作简单,成本低,特异性好,敏感性高,能有效的应用于非洲猪瘟的筛查和快速诊断。