精品 C12N15/85
本发明公开了定点突变LDLR基因的方法。本发明公开的定点突变LDLR基因的方法，包括向受体动物细胞中导入靶向LDLR基因靶序列的gRNA的编码基因与Cas9的编码基因，得到LDLR基因被定点突变的动物细胞；LDLR基因靶序列为序列表中序列3的核苷酸序列或序列表中序列4的核苷酸序列；靶向LDLR基因靶序列的gRNA的序列为将序列表中序列5或序列6中的T替换为U得到的序列。实验证明，本发明的靶向LDLR基因靶序列的gRNA能高效识别猪LDLR基因，在其作用下LDLR基因平均编辑效率可达50％，表明本发明的方法可以用来定点突变LDLR基因。
精品 C07K19/00
本发明涉及具有免疫保护性的副猪嗜血杆菌融合蛋白CdtB‑OppA。经实验融合蛋白CdtB‑OppA免疫组的保护率为90％，要高于纯化蛋白CdtB+OppA免疫组的保护率80％。通过融合蛋白的形式，不仅有利于减少生产时的工艺复杂度和降低成本，并且免疫效果更好，可以单独或与其他蛋白一起作为联合疫苗。
精品 C12N7/01
本发明公开了一种重组欧洲禽源H1N1亚型猪流感疫苗株，该重组疫苗株包含：欧洲禽源H1N1亚型猪流感病毒SH1株的HA和NA基因、以及PR8病毒的PA、PB1、PB2、M、NP和NS六个内部基因。本发明还公开了上述重组猪流感疫苗株的制备方法及应用。本发明的重组猪流感疫苗株，在MDCK细胞上具有较高的病毒滴度，经灭活后制备的重组高产细胞灭活疫苗能对欧亚禽源H1N1亚型猪流感病毒的攻击提供完全有效的免疫保护。
精品 C12N7/00
本发明公开了一种猪嵴病毒的培养方法，用MDCK细胞成功地对猪嵴病毒进行分离培养，并进行了传代，成功获得了可以用于猪嵴病毒分离传代的细胞系，利用PCR方法证实了其传代培养分离病毒的效果，首次提出了一种能用于猪嵴病毒培养的细胞系，具有一定的创新性。
精品 G01N33/531
本发明公开了一种猪瘟病毒血清总抗体固相阻断ELISA试剂盒所用抗原的制备方法，属于生物领域，方法是将CSFV疫苗株C‑株细胞培养抗原灭活、浓缩、不同截留分子量层析柱纯化全抗原，稳定包被酶标板作为检测抗原，结合辣根过氧化物酶标记羊抗CSFV高免血清抗体作为阻断抗体，TMB底物和终止液的联合使用，使用完整CSFV粒子作为抗原用于检测抗猪瘟病毒血清总抗体的固相阻断ELISA检测方法。可以系统、真实、完整描述猪瘟疫苗免疫过程中抗体产生的特征规律，对猪瘟疫苗接种和防疫具有重要意义。
精品 C12Q1/70
本发明公开了一种快速检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT‑RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针，所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP‑PRRSV)，与猪瘟病毒、C型‑猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪2型圆环病毒、猪伪狂犬病毒以及口蹄疫病毒等不反应。实验证明，本发明的试剂盒能够在40℃，扩增20min的条件下检出最少70个拷贝的模板，且与RT‑qPCR具有很高的符合度。由此说明，本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测HP‑PRRSV，本发明的提出为HP‑PRRSV的鉴别诊断提供了有效技术手段。
精品 C12N15/85
本发明提供一种表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的重组新城疫病毒疫苗株的制备方法及重组新城疫病毒疫苗株。本发明的方法包括：构建其中插入非洲猪瘟病毒（ASFV）的p72基因的重组转录质粒，构建转录辅助质粒系统，将上述转录质粒和转录辅助质粒共转染所述新城疫致弱株可以复制的宿主细胞BHK‑21，拯救获得重组病毒株。利用本发明制备的表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的疫苗株，在防控该动物疫病方面具有重要的储备和战略意义，并可在治疗与预防非洲猪瘟病毒中应用。
精品 C12Q1/44
一种猪饲料非淀粉多糖酶谱的快速筛选方法，包括如下步骤：饲料非淀粉多糖组分的分析、非淀粉多糖酶类型和剂量的设定、饲料胃肠道模拟消化、非淀粉多糖酶谱的优化。本发明采用非淀粉多糖酶组分分析技术和体外模拟消化法，使用饲料体外能值表征非淀粉多糖酶的作用效果，快速获取饲料中添加的最优非淀粉多糖酶谱。
精品 C12N15/113
本发明提供一种针对蛔虫三期幼虫特异表达的miRNA—asu‑miR‑36f的抑制剂，该抑制剂可以特异性的抑制猪蛔虫三期幼虫特异表达的asu‑miR‑36f。所述抑制剂的核苷酸序列为：UGACAAGGAUUGCAGCCCGGUGA。本发明的抑制剂通过与asu‑miR‑36f结合，显著降低了asu‑miR‑36f的丰度，并且显著影响了猪蛔虫三期幼虫的发育及降低了感染率。本发明所提供的蛔虫三期幼虫特异表达的miRNA—asu‑miR‑36f抑制剂可应用于影响猪蛔虫和人蛔虫三期幼虫生长发育或与其感染性相关的功能。
精品 A01K1/015
本发明提供了一种污染无外排的利用农业废弃物转化猪粪尿的资源化方法，具体提供了一种养殖生猪的方法，该方法包括如下步骤：(1)将草本农业废弃物分别粉碎为粉状碎屑和段状碎屑，并且混合得到发酵原料；(2)将所述发酵原料与猪粪尿和发酵菌剂混合，得到发酵起始物料；(3)将所述发酵起始物料在通气条件下进行好氧发酵；并且将好氧发酵产物在密闭条件下进行限氧发酵，得到限氧发酵产物；(4)将所述限氧发酵产物作为猪舍垫料，在所述垫料上养殖生猪。通过上述技术方案，本发明在不使用木屑和菌渣等木本材料的基础上，能够利用草本农业废弃物实现规模化养猪的猪粪尿污染无外排。
精品 A01K5/00
本实用新型公开了一种仔猪饲喂下料装置，包括：主支架，用于为装置其他部分结构提供良好支撑；料筒，通过料筒支架设置于主支架中部，所述料筒两侧还通过辅助支架连接至所述主支架；所述料筒底部开放，设置有料筒下开口；内套筒，中空且上表面封闭、下表面开放，设置于所述料筒下开口下方；外套筒，中空且上下表面均开放，套装于所述内套筒外部，与所述内套筒之间留有供饲料漏下的空隙；分料机构，设置于所述内套筒上表面与所述料筒下开口之间；当所述分料机构启动时，带动料筒下开口处饲料移动，从内套筒与外套筒之间的空隙漏下；注水机构，设置于所述内套筒内，启动时朝向下方注水；料槽，设置于所述主支架下部，位于所述内套筒和外套筒下方。
精品 C12N15/113
本发明提供了一对特异识别猪H11位点的sgRNA及其编码DNA和应用，该sgRNA对由sgRNA‑F和sgRNA‑R组成，sgRNA‑L的核苷酸序列如下1)或2)：1)序列表中的序列1所示的核苷酸序列；2)将所述1)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与1)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列；sgRNA‑R的核苷酸序列如下3)或4)：3)序列表中的序列2所示的核苷酸序列；4)将所述3)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与3)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列。本发明能大大增加外源基因定点插入的效率，为转基因猪的制备提供了稳定的平台。
粤公网安备44011202003051号