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  • 一种用CRISPR系统将量子点标记至病毒核酸的方法和应用

    精品 C12N7/01

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    一种用CRISPR系统将量子点标记至病毒核酸的方法和应用,它涉及病毒领域,本发明的目的是为了解决可视化研究伪狂犬病病毒中,采用目前已有方法将量子点标记至伪狂犬病病毒囊膜上,很有可能影响病毒对宿主细胞的侵染性的问题,本发明提出了一种量子点标记病毒核酸的新方法,标记后观察PRV侵入宿主细胞的动态过程,有望揭示PRV对宿主细胞的侵染机制,为我国猪伪狂犬病的防控研究提供理论依据,本发明应用于伪狂犬病病毒领域。

  • 一种快速检测非洲猪瘟的试剂盒

    精品 C12Q1/70

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    本发明公开了一种快速检测非洲猪瘟的试剂盒。它包括快速检测非洲猪瘟的试纸条、引物对、金标探针和缓冲溶液;试纸条包括沿样品流动方向的样品吸收垫、反应膜、吸水垫依次固定于底板上;检测区通过链霉亲和素包被在反应膜上形成;质控区包被有连接链霉亲和素或生物素的质控探针在反应膜上形成;引物对为5'端修饰有生物素的上游引物和下游引物5'端与一段序列tail相连,下游引物与序列tail两段序列中间修饰C3 spacer;金标探针为胶体金标记的探针;探针与下游引物的tail互补,同时与试纸条的质控探针的核苷酸互补。本发明借助于双链互补原则,降低了实验材料的成本,实现简单快速低成本的现场检测。

  • 一种附红细胞体重组表位抗原及其免疫检测试剂盒

    精品 C07K14/29

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    本发明提供了一种附红细胞体重组表位抗原及其免疫检测试剂盒。本发明对猪附红细胞体HspA1蛋白进行了B细胞抗原表位的预测,筛选并截取HspA1蛋白的B细胞抗原表位富集区,通过原核表达获得重组HspA1表位富集区蛋白,用纯化后的重组HspA1表位富集区蛋白作为包被抗原,建立了检测猪附红细胞体的间接ELISA方法,构建了诊断试剂盒,为检测人和动物的猪附红细胞体感染以及猪附红细胞体的流行病学调查提供有效手段。

  • 表达猪瘟病毒E2蛋白重组PRRS病毒基因工程疫苗的构建方法和应用

    精品 C12N15/85

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    本发明提供了一种表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法,以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗。基于反向遗传操作平台,根据猪瘟石门株和猪瘟兔化弱毒株C株的E2基因,以及高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞致弱疫苗株HuN4‑F112的基因构建了pA‑SM‑E2和pA‑C‑E2这两个重组质粒。转染MARC‑145细胞后,成功拯救出活病毒,并且发现重组病毒(vA‑SM‑E2和vA‑C‑E2)与亲本毒vHuN4‑F112具有相似的病毒学特性。选取vA‑SM‑E2进行了猪体免疫实验,发现其对猪体具有较好的安全性,免疫后可以有效诱导机体产生免疫应答,产生高水平的针对PRRSVN蛋白和CSFV E2蛋白的抗体,是一种良好的基因工程疫苗候选株。

  • 一种检测猪水泡病毒抗原的酶联免疫试剂盒及定量检测方法

    精品 G01N33/569

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    本发明提供一种定量检测猪水泡病毒抗原的酶联免疫试剂盒,所述试剂盒包括猪水泡病毒标准抗原、猪水泡病毒特异性第一抗体、猪水泡病毒特异性第二抗体和酶标抗体。本发明还提供上述酶联免疫试剂盒在定量检测猪水泡病毒抗原中的应用。本发明是蔗糖密度梯度离心、ELISA方法的有机结合体,是集二者之长而去其不足。本发明操作简单、稳定性好、适合于批量样品检测,是抗原定量和疫苗中有效抗原含量检验的理想方法。因此,本发明的方法在SVDV抗原生产、实时监测、疫苗质量评估等方面能够发挥重要作用。

  • 猪圆环病毒2型抗体快速检测层析试纸条及制备方法

    精品 G01N33/68

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    本发明涉及一种猪圆环病毒优势抗原表位肽建立快速检测层析试纸条及制备方法,可用于快速检测猪血液或血清中的抗体。试纸条包括支撑层,以及在所述支撑层上依次设置的加样层、金标蛋白释放垫、检测层和吸收层。金标抗体释放垫包埋有胶体金标记的重组G蛋白,检测层上设置有检测带和质控带,检测带固定有猪圆环病毒2型核衣壳蛋白上的优势抗原表位肽,质控带固定有ProteinG免疫兔血清纯化后的IgG。本发明的试纸条操作简单、重复性好、灵敏度高,结果快速直观、工艺简单可大量制备,成本低廉,适合基层大批量现场检测并可用于猪群PCV2感染的早期快速诊断。

  • 猪链球菌SBP_bac_5基因缺失株及其构建方法与应用

    精品 C12N1/21

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    本发明公开了一种猪链球菌SBP_bac_5基因缺失株及其构建方法与应用。所述缺失株为不含抗性标记的SS△SBP_bac_5,保藏编号为:CGMCC No.10076。本发明是采用RecA同源重组系统,利用温敏自杀质粒pSET4s作为载体对猪链球菌7型菌株SBP_bac_5编码的基因进行敲除而得到的菌株,破坏了SBP_bac_5蛋白的表达。本发明得到的S.suis 7型SS△SBP_bac_5株比亲本株的毒力弱,对动物安全。用重组菌制成疫苗,免疫CD1小鼠,实验结果表明:该猪链球菌重组菌疫苗能有效诱导机体产生特异性的体液免疫应答,使免疫小鼠获得抗S.suis攻击的保护,并可有效阻止细菌在体内的增值。本发明得到的工程菌为猪链球菌疫苗的研制提供了重要依据。

  • 一种猪IGFN1蛋白多克隆抗体及其制备方法和应用

    精品 C07K14/47

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    本发明公开了属于动物基因工程领域的一种用于诱导猪IGFN1蛋白多克隆抗体的抗原多肽,该抗原多肽由SEQ ID No:1所示的氨基酸序列组成的;其次,本发明公开了由SEQ ID No:2所示的核苷酸序列组成所述抗原多肽的编码基因;此外,本发明还公开了一种猪IGFN1蛋白多克隆抗体。本发明猪IGFN1蛋白多克隆抗体对猪IGFN1蛋白表达水平的检测特异性强,为IGFN1在猪组织中的表达分析及其相关研究提供了重要工具;其次,本发明中的抗原序列长,检测灵敏度高。

  • 一种水疱性病检测试剂盒

    精品 C12Q1/70

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    本发明公开一种可同时用于口蹄疫(A型、O型和Asia 1型)、猪水泡病和水疱性口炎检测的引物、由这些引物构成的试剂盒和制备方法,以及这种试剂盒非疾病诊断目的的使用方法。本发明的用于检测口蹄疫A型、O型和Asia 1型病毒的引物基因序列共10条,试剂盒中除主十条引物外还包括2条通用引物。相关实验表明本发明的敏感性高于普通荧光定量PCR技术,与荧光定量PCR相比可大大的节省时间,可以避免非特异性产物的扩增,同时有效地避免了引物的偏好向现象,提高了检测的灵敏性。

  • 重组猪细小病毒VP2蛋白、表达该蛋白的重组多角体病毒及其在疫苗制备和病毒诊断中的应用

    精品 C07K14/015

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    本发明公开了一种重组猪细小病毒VP2蛋白、表达该蛋白的重组多角体病毒及其在疫苗制备和病毒诊断中的应用。通过对原始VP2蛋白进行改造,使得改造后的VP2蛋白HA效价由213提高到218,进一步的,本发明还获得了表达该重组猪细小病毒VP2蛋白的重组多角体病毒,实验证明,通过该病毒表达的重组VP2蛋白具有免疫原性好、效价高等优点。使用由本发明的VP2蛋白制备得到的猪细小病毒VP2亚单位疫苗免疫初产健康阴性母猪能够预防由猪细小病毒引起的疾病,而且具有安全、产生抗体快、免疫期持久等优点。此外,本发明应用改造后的VP2蛋白作为抗原包被酶标板,建立了猪细小病毒抗体的间接ELISA方法,灵敏度高、特异性好,为猪细小病毒的诊断以及检测提供了一种良好的技术手段。

  • PRRSV基因标记疫苗株ELISA鉴别诊断试剂盒及方法和应用

    精品 G01N33/68

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    本发明公开一种PRRSV基因标记疫苗株ELISA鉴别诊断试剂盒,所述试剂盒包含25aa多肽抗原,该25aa多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明PRRSV基因标记疫苗株ELISA鉴别诊断试剂盒,以PRRSV基因标记疫苗株(rHN4?Δ25+NP49株)特异性标记区域缺失的25aa多肽作为包被抗原,具有特异性强、灵敏度高、重复性好的特点,可快速、准确地区分传统PRRS疫苗免疫与标记疫苗免疫猪的血清抗体,同时可快速、准确地鉴别诊断出PRRSV基因标记疫苗株与自然感染毒株,对于PRRS基因标记疫苗株的临床广泛应用具有重要意义。

  • 一种含有交联花生蛋白的香肠及其制备方法

    精品 A23L13/60

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    本发明公开了一种含有交联花生蛋白的香肠及其制备方法,通过转谷氨酰胺酶作用使花生蛋白进行交联,得到功能性大幅度改善的交联花生蛋白,并将其作为主料之一应用于香肠的制备中,不仅可提高香肠的营养和品质,而且作为大豆蛋白的替代物应用于香肠的制备中,能够解决大豆蛋白价格持续上升,供应紧缺的难题,尤其可利用花生榨油的副产品花生粕,不仅成本低廉,而且营养丰富,开辟了继大豆蛋白之后的新的优质蛋白质资源,有效降低香肠的生产成本。另外,本发明通过加入一定重量份的猪背脂,并通过使用冰水进行混合,得到有利于改善香肠口感和品质的乳化体,通过加入一定比例的蛋液,使香肠的口味和品质更加优良。