精品 C07K14/085
本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种高效表达A型塞内卡病毒结构蛋白的方法。本发明首先对编码A型塞内卡病毒三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的基因进行原核表达密码子优化，并借助小泛素样融合蛋白，获得了在大肠杆菌中同时可溶性表达三种结构蛋白的单个质粒；其次，在大肠杆菌中转入分子伴侣质粒和上述A型塞内卡病毒结构蛋白质粒，进一步提高了A型塞内卡病毒结构蛋白的可溶性表达，并解决了目标蛋白表达量不均一的问题，获得的目标蛋白约占菌体总蛋白25％以上；由表达获得的三种结构蛋白配制获得的塞内卡病毒病亚单位疫苗，能够激发猪体产生较高水平的中和性抗体，对国内A型塞内卡流行毒具有良好的保护作用。
精品 C07K14/01
本发明涉及一种非洲猪瘟病毒重组抗原及其应用，属于基因工程技术领域，所述m35重组抗原是通过对非洲猪瘟病毒蛋白p30、p54抗原蛋白预测筛选出的表位串联而成，氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。所述重组抗原m35与阳性猪血清有免疫反应，可作为免疫识别抗原，可用于猪的非洲猪瘟病毒病的诊断，且诊断敏感性好、特异性高、可信度高。
精品 C12N15/41
本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒表位基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明获得SVV/FJ/001株全长cDNA，并对其5'UTR进行缺失及突变改造，同时在SVA cDNA中融合进串联的O型FMDV的重组表位基因，构建得到重组口蹄疫抗原表位的塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的口蹄疫B细胞表位和T细胞表位，且表达产物具有良好的反应原性，重组病毒的致病性显著降低甚至对猪无致病性，显著提高了毒株的生物安全性；制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性，在有效激发SVA中和抗体的同时还能产生针对FMDV的特异性抗体，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
精品 C07K16/08
本发明公开了一种抗非洲猪瘟病毒的单链抗体及其制备方法和用途，本发明从自然感染非洲猪瘟免疫耐过猪的外周血中分离得到淋巴细胞，提取分离到的淋巴细胞的总mRNA，通过RT‑PCR的方法得到总cDNA片段，以cDNA为模板，在相应的带有Linker接头的引物的作用下，通过SOE‑PCR的方法得到猪源ScFv抗体基因序列，将ScFv抗体基因序列构建至pET‑30a载体，转化BL21感受态细胞，从转化后的单个菌落中筛选得到一个针对于非洲猪瘟病毒的ScFv抗体(VH‑VLκ6)，采用ELISA试验对筛选得到的ScFv抗体(VH‑VLκ6)进行初步活性鉴定，表明此抗体具有非洲猪瘟反应活性。本发明的提出为非洲猪瘟的早期诊断与防控提供了新的材料，为尽快控制非洲猪瘟的疫情传播提供了新的技术手段。
精品 A23K10/30
本发明公开了一种校正饲料原料氨基酸消化率用于猪饲料配制的方法，包括:(1)在生长猪回肠末端安装瘘管以收集动物的回肠末端食糜，测定氨基酸的回肠末端消化率；(2)在限制饲养条件下测定生长猪饲喂半纯合饲粮时的AID和SID；在自由采食条件下测定生长猪饲喂常规饲粮时的日粮氨基酸消化率；(3)以采食量FI和饲粮中营养成分浓度建立各个氨基酸消化率的校正系数二元回归预测方程：通过将半纯合日粮中该氨基酸的浓度以及试验时日采食量占实验猪体重百分比带入方程，得出的消化率校正系数乘以半纯合日粮测定的该氨基酸消化率即得到校正消化率；经验证，使用校正后饲料原料氨基酸消化率数值配制全价配合饲料，所得配合饲料可消化氨基酸含量与实际测定值基本吻合。
精品 C12N7/01
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株Δ20/40的构建及作为疫苗的应用。本发明采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFVCN/GS/2018中联合缺失了MGF‑110‑9L基因和MGF‑360‑9L基因编码蛋白的功能，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康，且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
精品 C12N15/41
本发明提供一种塞内卡病毒重组核酸、重组疫苗株及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了塞内卡病毒重组核酸、包含所述重组核酸的塞内卡重组病毒、由所述重组核酸编码的塞内卡重组病毒、包含所述塞内卡重组病毒的塞内卡重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明制备出了抗原产能高、致病性显著降低甚至对猪无致病性、抗体应答强、免疫保护率高等为特征的疫苗株，该疫苗株显著提高了生物安全性，可用于我国及周边国家塞内卡病毒的防控。
精品 C12N7/08
本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒疫苗株及其制备方法，所述疫苗株为将FJzz1在Vero细胞连续传至200代获得。选取低代次FJzz1‑F20和高代次FJzz1‑F200毒株对仔猪进行了致病性评价，结果显示高代次FJzz1‑F200感染组仔猪临床表现明显轻于FJzz1‑F20感染组，且发病猪未有死亡。与FJzz1‑F20感染组相比，FJzz1‑F200感染组仔猪的粪便排毒量和肠组织中的病毒载量显著降低，且肠道组织无明显组织病理学改变。同时，检测发现FJzz1‑F200感染组在肠组织中可以诱导高水平的I型和III型干扰素产生。上述研究结果表明，本发明的FJzz1‑F200其致病性弱，具有作为PEDV候选弱毒疫苗毒株的潜力。
精品 G16Z99/00
本发明公开一种猪肉产量预测方法及系统。该方法包括：获取当年当月的后备母猪数量、能繁殖母猪数量、未出栏的各个月龄大的生猪数量和生猪出栏量；根据所述未出栏的各个月龄大的生猪数量和未出栏生猪的猪龄计算第二个月至第七个月的每个月的生猪出栏量；所述第二个月为当月的下一个月；根据所述能繁殖母猪数量计算第八个月的生猪出栏量；根据所述能繁殖母猪数量和所述后备母猪数量计算第九个月至第十二个月的每个月的生猪出栏量；根据所述当年当月当月至所述第十二个月的每个月的生猪出栏量计算未来一年内的猪肉产量。本发明的方法及系统能够提高猪肉产量预测的准确度。
精品 C12N15/113
本发明涉及circRNA_26852及其应用，具体涉及circRNA_26852及其在猪分子辅助育种中的应用。本发明首次对大白猪和莱芜猪皮下脂肪组织中circRNA表达情况进行鉴定分析，以期能找出与成脂分化和脂质代谢相关的潜在circRNA。结果显示，circRNA_26852通过与ssc‑miR‑486、ssc‑miR‑874等miRNA结合，调控脂肪沉积和脂质代谢相关信号通路中相关基因的表达。揭示circRNA_26852通过与miRNA结合，进而调控信号通路中相关基因的表达，在脂肪沉积和脂质代谢中发挥潜在调控作用，为家畜的良种开发奠定基础。
精品 G01N33/00
本发明公开了一种高水溶性猪小肠消化酶粉剂及其制备方法。所述猪小肠消化酶粉剂是按照包括下述步骤的方法制备得到的：1)从若干头猪的小肠中采集肠道食糜并将其混合均匀，然后将混合后的肠道食糜进行离心1，收集上清液1；2)对所述上清液1进行蒸发浓缩，得浓缩肠液；将所述浓缩肠液进行离心2，收集上清液2；3)将所述上清液2转移到置于冰水浴的容器中，并向其中加入甘露醇，搅拌溶解后，再加入乙醇溶液，搅拌均匀后静置；然后进行离心3，收集沉淀；4)向所述沉淀中加入去离子水，并进行搅拌和超声溶解，然后进行离心4，收集上清液3；将所述上清液3进行冷冻干燥，即得。本发明制备的肠道消化酶粉剂，提高了消化酶比活性，降低杂质含量，提高消化酶的溶解性。
精品 C12N15/113
本发明提供了一种特异性识别猪CD13基因的成套sgRNA及其编码DNA、试剂盒和应用，涉及基因工程技术领域。该成套sgRNA包括sgRNA‑L‑1和sgRNA‑R‑2，其中述sgRNA‑L‑1含有负责识别靶片段的如SEQ ID NO.1所示序列；sgRNA‑R‑2含有负责识别靶片段的如SEQ ID NO.2所示序列。该成套sgRNA特异性识别猪CD13基因的第二外显子，能有效减少CRISPR/Cas9系统引起的脱靶现象，减少非特异性切割对基因组带来的不利影响。
粤公网安备44011202003051号