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  • 一种猪圆环病毒2型的大规模全悬浮培养方法

    精品 C12N5/071

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    本发明公开了一种猪圆环病毒2型的大规模全悬浮生产方法。本发明发明人驯化了一株适应大规模无血清全悬浮培养的猪肾细胞,命名为sPK15‑YP,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其菌种保藏编号为:CGMCC NO.13846。本发明采用适应全悬浮培养的sPK15‑YP细胞无血清大规模培养猪圆环病毒2型(PCV2),取代了传统的转瓶培养工艺,减少了人力资源,提高了产品的质量,解决了PCV2全病毒培养病毒含量低的瓶颈问题,通过全悬浮sPK15‑YP细胞技术制备得到了高效价的PCV2半成品,利用中空纤维法对PCV2病毒培养液进行浓缩纯化获得了更加纯净的PCV2病毒浓缩抗原。本发明的提出为PCV2多联多价疫苗的研究奠定了坚实基础,减少了疫苗的用量,降低了猪群的应激,提高了猪群的免疫水平。

  • 一种猪流行性腹泻病毒疫苗毒CV777与野毒株鉴别引物

    精品 C12Q1/70

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    一种猪流行性腹泻病毒疫苗毒与野毒株鉴别引物及其制备方法,属于猪流行性腹泻病毒的检测技术领域具体设计PEDV疫苗毒CV777与野毒株,其差异基因序列为:GTCTTCCTGTGGCACCTGAAACAA。对应引物如包括Ps1,其序列为:ACACTATACTATCCCACCG;Pa1,其序列为:TTTCAGGAGCTACATTARG;Pa2,其序列为:CACCCAAAGATCCCAAGA;其中Ps1/Pa1引物对扩增片段长度为505bp;Ps1/Pa2引物对扩增片段长度为793bp;本发明的制备方法包括步骤:RNA的提取、PEDV疫苗株与野毒株RT‑PCR鉴别、特异性试验、敏感性试验、检测结果。

  • 猪场生物安全系统

    精品 A01K1/00

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    本实用新型公开了一种猪场生物安全系统,包括设置在距离猪场预定距离之外的外围安全系统和设置在外围安全系统之内的内部生物安全系统。所述外围安全系统,包括对人员及个人物品进行消毒的人员消毒通道、将运输物资与人员的车辆进行消毒的车辆消毒通道、将猪场物资进行消毒和缓存的物资消毒通道。所述内部安全系统包括猪场场区外的场外安全系统、猪场内部的猪场区安全系统和生产区安全系统。

  • 猪场生物安全系统

    精品 A01K1/00

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    本发明公开了一种猪场生物安全系统,包括设置在猪场内的内部生物安全系统和猪场之外的外部生物安全系统。内部生物安全系统,包括生产线人员消毒通道、生产线物资消毒通道、猪场内部道路和设施进行消毒的道路消毒车、生活区与生产区围挡,前置换衣间以及存放猪场内物料的物资库、以及用于将猪运出或送入猪舍的出猪台。外部生物安全系统包括设置在距离猪场预定距离之外的外围安全系统和设置在猪场场区外外围安全系统之内的场外安全系统,所述内部安全系统和外部安全系统的各组成部分进出通道均只可单向流通。

  • 猪ω7干扰素突变体及其制备方法和应用

    精品 C07K14/555

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    本发明公开了猪ω7干扰素突变体及其制备方法和应用。本发明首先公开了氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的猪ω7干扰素以及将其进行单位点突变获得的序列为SEQ ID NO.3所示的抗病毒活性提高的突变体。本发明将该突变体编码基因进行密码子优化得到抗病毒活性明显提升的优化基因。本发明还将SEQ ID NO.3所示突变体分别进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变获得多个抗病毒活性显著提高的猪ω7干扰素突变体。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达所述猪ω7干扰素突变体,所表达产物的抗病毒活性大幅提高。本发明提供的猪ω7干扰素突变体能够用于制备预防或治疗猪病毒性疾病的药物或试剂。

  • 出猪台装置

    精品 A01K1/00

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    本实用新型公开了一种出猪台装置,包括出猪通道以及出猪通道两端的门;所述出猪通道的一端为猪舍端,连接至猪舍,此端的门为猪舍端门,另一端为出猪端,此端的门为出猪端门;所述猪舍端门和出猪端门之间各有猪舍端护栏和出猪端护栏,所述猪舍端护栏位于猪舍端门之后,距离猪舍端门第一预定距离,所述出猪端护栏位于出猪端门之后,距离出猪端门第二预定距离;所述出猪通道的顶棚为透明顶,所述出猪通道的出猪端比猪舍端更高,形成5‑30度之间坡度的坡道;所述出猪通道下部具有一组或以上支撑柱,所述一组或以上支撑柱支撑出猪通道形成所述坡道,本实用新型的出猪台装置,能够提供猪舍与外部的安全方便的通道,而且还能对通道进行附加消毒处理,保障猪场的安全运行。

  • 猪流行性腹泻病毒特异性SIgA ELISA检测试剂盒及其应用

    精品 C07K16/10

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    本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)特异性SIgA ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括抗SIgA SC片段的单克隆抗体,所述的单克隆抗体由微生物杂交瘤细胞株2F9分泌产生,所述的杂交瘤细胞株2F9保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其微生物保藏号是:CGMCC No.13813。本发明以初乳中纯化出的SIgA为抗原,免疫BalB/C小鼠,获得一株稳定分泌针对于SIgA分子分泌片(SC)的杂交瘤细胞株,并建立了检测PEDV特异性SIgA抗体的ELISA方法及试剂盒,实验证明,该方法具有较好的特异性和敏感性。本发明的提出为进一步研究猪感染PEDV和PEDV疫苗免疫后特异性SIgA水平及黏膜免疫评价提供了有效的技术手段。

  • 一种耐酸性玉米赤霉烯酮解毒酶及其编码基因与应用

    精品 C12N9/24

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    本发明涉及酶工程领域,具体公开了一种耐酸性玉米赤霉烯酮解毒酶及其编码基因与应用。本发明通过对玉米赤霉烯酮解毒酶的氨基酸序列进行优化,改变了解毒酶的8个氨基酸残基(与zlhy‑6解毒酶有8个氨基酸差异),使重组表达玉米赤霉烯酮解毒酶最适反应pH由8.5降低到6.5,与猪、鸡肠道pH非常吻合,当pH低至5.0时,解毒酶酶活仍保留40%以上,大大提高该玉米赤霉烯酮解毒酶作为饲料添加剂在实际应用中的解毒效率。本发明还通过对玉米赤霉烯酮解毒酶基因进行密码子优化,并将该基因在重组酵母基因组中的拷贝数增加到4,大大提高了玉米赤霉烯酮解毒酶的表达量。

  • 一种快速注射型净化柱和检测猪皮中结晶紫含量的方法

    精品 G01N30/02

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    本发明提供一种快速注射型净化柱和检测猪皮中结晶紫含量的方法,所述快速注射型净化柱包括由以下重量份的组分组成的填料:多壁碳纳米管4~8份、PSA填料4~8份、C18填料2~4份、无水硫酸镁20~40份和弗罗里硅土0.5~1.5份。本发明提供的快速注射型净化柱具有良好的去脂效果,以及良好的降低基质效应干扰效果。本发明提供的检测方法操作简单、快速,成本低,回收率高,可以达到81~95%,检测限低,适用于准确检测猪皮中残留的结晶紫。

  • 表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其构建方法和应用

    精品 C12N7/01

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    本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其构建方法和应用。本发明首先公开了一株表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株,是以gE、gI及TK三基因缺失的重组伪狂犬病病毒变异株为载体构建的表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株,其微生物保藏编号为:CGMCC No.12038。本发明所述表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株具有遗传稳定性,能够稳定表达E2蛋白,对仔猪具有很高的安全性,能够同时诱导高水平的伪狂犬病病毒和猪瘟病毒的特异性抗体及中和抗体,对猪瘟病毒和伪狂犬病病毒变异株的攻击能够提供完全的保护,可作为防控当前流行的伪狂犬病病毒变异株及猪瘟病毒混合感染的二价基因工程疫苗候选株。

  • 伪狂犬病毒基因工程gB重组弱毒疫苗株及应用

    精品 C12N7/01

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    本发明公开了一种伪狂犬病毒基因工程gB重组弱毒疫苗株及应用,本发明利用CRISPR/Cas9结合同源重组等技术,以伪狂犬病毒疫苗株Bartha‑K61基因组为骨架,通过将Bartha‑K61的gB基因替换为我国流行的伪狂犬病毒变异株JS‑2012株的gB基因,成功获得一株重组伪狂犬病毒Bar‑JS‑gB(BJB)。BJB具有稳定的遗传性,以之作为疫苗株制备的灭活疫苗免疫小鼠比Bartha‑K61株制备的灭活疫苗更能有效抵抗强毒株JS‑2012株攻击。这显示BJB株具有更好的免疫原性,更能有效控制我国PRV变异株的流行,将在我国控制猪伪狂犬病上发挥重要作用。

  • 猪λ3干扰素突变体及其制备方法和应用

    精品 C07K14/57

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    本发明公开了猪λ3干扰素突变体及其制备方法和应用。本发明首先公开了氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的猪λ3干扰素及其编码基因。本发明将猪λ3干扰素编码基因按照家蚕密码子偏好性进行密码子优化得到抗病毒活性提升的SEQ ID NO.3所示的优化基因。本发明进一步将SEQ ID NO.3所示的优化基因分别进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变获得多个抗病毒活性呈显著提升的猪λ3干扰素突变体。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达所述猪λ3干扰素突变体,所表达产物的抗病毒活性提高显著。本发明提供的猪λ3干扰素突变体能够用于制备预防或治疗猪病毒性疾病的药物或试剂。