

精品 C12N7/00
本发明公开了一株通过细胞低温传代和药物筛选致弱的猪伪狂犬病病毒基因缺失弱毒疫苗株及其应用。该弱毒疫苗株是在一株猪伪狂犬病病毒变异株(命名为HeN1株,其微生物保藏编号为CGMCC NO.6656)的基础上,首先通过在Vero细胞上低温传代筛选获得了在US区存在包括gI、gE、Us9、Us2及部分反向重复序列在内的大片段缺失的病毒,然后进一步通过药物筛选致使其TK基因部分缺失。该基因缺失弱毒疫苗株命名为PRV TP株,其微生物保藏编号为CGMCC NO.12300。本发明的弱毒疫苗株可制备成活疫苗或灭活疫苗(单苗或联苗)等,都可有效预防猪伪狂犬病,也可将其制备成诊断或治疗猪伪狂犬病的试剂。本发明的猪伪狂犬病弱毒疫苗株PRV TP株具有安全性好、保护效率高、利于鉴别诊断等优点。
精品 C07K16/10
本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体,编码所述抗体的核苷酸序列为:SEQ ID NO.1,SEQ ID NO.2,SEQ ID NO.3,SEQ ID NO.4,SEQ ID NO.5,SEQ ID NO.6,SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8。本发明的效果在于:利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库,筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变区抗M蛋白VHH抗体基因编码序列,对其进行可溶性表达和ELISA实验证明其均可以同M蛋白相结合,吸光度OD405值的不同表明其同M蛋白结合能力各有差异。8株VHH抗体可通过E.coli的表达,而制备体外重组的基因工程抗体。
精品 G01N33/531
本发明公开了一种猪瘟病毒血清总抗体固相阻断ELISA试剂盒所用抗原的制备方法,属于生物领域,方法是将CSFV疫苗株C‑株细胞培养抗原灭活、浓缩、不同截留分子量层析柱纯化全抗原,稳定包被酶标板作为检测抗原,结合辣根过氧化物酶标记羊抗CSFV高免血清抗体作为阻断抗体,TMB底物和终止液的联合使用,使用完整CSFV粒子作为抗原用于检测抗猪瘟病毒血清总抗体的固相阻断ELISA检测方法。可以系统、真实、完整描述猪瘟疫苗免疫过程中抗体产生的特征规律,对猪瘟疫苗接种和防疫具有重要意义。
精品 G01N33/569
本发明公开了一种定量检测猪瘟病毒IgG抗体竞争ELISA试剂盒及其检测方法,属于生物领域,以解决现有CSFV血清抗体检测ELISA试剂盒存在的稳定性差和保质期短等问题。本发明试剂盒是将特异性鉴定和筛选来自猪瘟病毒疫苗株C‑株编码的E2蛋白两个重复的抗原结构域A通过柔性氨基酸接头、半胱氨酸、疏水氨基酸进行融合串联,并在大肠杆菌E.coli中成功获得重组表达蛋白,重组蛋白命名为r2E2,以其作为抗原建立的定量检测抗猪瘟病毒E2蛋白IgG抗体竞争ELISA试剂盒。本试剂盒的检测结果能够反应接种疫苗过程中,机体抗CSFV血清IgG抗体变化规律,为养猪户CSF防控提供科学合理的技术支持。
精品 C12N9/12
本发明提供了一种IRAK‑M抗原、编码氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示的蛋白质的核酸、含有编码氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示的蛋白质的核酸的载体、包含该载体的转化体和一种IRAK‑M多克隆抗体及其制备方法。该抗体通过包括以下步骤的制备方法制得:以氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示的蛋白质为免疫原免疫动物,从所述动物中获得所述IRAK‑M多克隆抗体。本发明IRAK‑M多克隆抗体与猪IRAK‑M分子反应性良好,在Western杂交中不产生影响目的蛋白检测的非特异反应,能够用于蛋白免疫印迹与荧光检测试验中特异性地与猪IRAK‑M产生良好的免疫反应。
精品 C12P7/64
本发明涉及一种亚临界体系中酶法制备1,3‑二油酸‑2‑棕榈酸甘油三酯的方法,包括如下步骤:(1)原料准备:选取胆固醇质量含量低于0.05%的猪油作为原料A,或者选取sn‑2棕榈酸质量含量不低于60%的重组棕榈油作为原料A;选取油酸、油酸酯中的至少一种作为原料B;(2)亚临界酶催化酯交换反应:在亚临界体系中,在脂肪酶的催化下,原料A与原料B在反应溶剂中发生选择性酶促酯交换反应,得到1,3‑二油酸‑2‑棕榈酸甘油三酯。该方法具有反应速率快,选择性高,酶用量少,无溶剂残留,易于大规模连续性生产的特点。
精品 C12Q1/70
本发明公开了一种快速检测猪2型圆环病毒的实时荧光RPA试剂盒及其用途,还公开了一种快速检测猪2型圆环病毒的试纸条RPA试剂盒及其用途。该两种试剂盒分别包括SEQ ID NO.1及SEQ ID NO.2所示的引物及各自的探针,虽然针对同一靶标序列,但引物和探针的修饰碱基和检测平台不同。实验证明本发明的两个试剂盒的敏感性均为102拷贝/反应,并均只能特异性检测猪2型圆环病毒。分别用本发明的两个试剂盒检测猪2型圆环病毒疑似样品,结果表明这两个试剂盒的检测结果与qPCR的符合度均为100%。因此,本发明的两个试剂盒均能快捷、高效、灵敏的检测猪2型圆环病毒,为猪2型圆环病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。
精品 C12Q1/6888
本发明公开了一种猪肉产品溯源鉴别的微卫星引物组合及其检测试剂盒。本发明提供了用于鉴定猪肉的成套引物,为如下1)或2):1)由引物对Sw632、S0155、Sw936、S0005、Sw830、S0225、S0355、Swr1941、Sw2406、S0097、Sw857、S0226、Sw72、Sw122、S0090、IGF1、Sw951、Sw787、Sw2525、S0107、Sw2448、Sw911和CGA组成;2)由引物组A、引物组B和引物组C组成;本发明方法中选取的23个微卫星标记具有多态性高、标记间不连锁、扩增片段具有多态性,易于基因分型,可实现分组多重PCR检测、节约成本、缩短时间、提高效率。
精品 C12Q1/6888
本发明公开了一种基于SMAD7基因的猪活体背膘厚标记辅助选择方法。本发明的方法为如下:检测猪个体的SMAD7基因第四内含子的第244位脱氧核糖核苷酸是C还是T还是C和T。通过试验证明:本发明用SMAD7基因第四内含子的第244位单核苷酸多态性来鉴定猪活体背膘厚的方法与猪活体背膘厚实际测定结果一致,对选择优良猪种有重要意义。
精品 G01N33/569
一种猪口蹄疫3ABC和2C抗体化学发光检测试剂盒,属免疫学检测领域,所述试剂盒包含化学发光免疫反应板、酶标抗体、血清稀释液、化学发光底物、化学发光增强剂和PBST洗涤液,其特征在于:所述化学发光免疫反应板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔板,每孔内底部联合包被3ABC和2C融合蛋白;所述酶标抗体为HRP‑兔抗猪lgG抗体;所述血清稀释液包含Tween‑20、牛血清白蛋白和大肠杆菌裂解液;所述化学发光底物为鲁米诺和牛血清白蛋白;所述化学发光增强剂含有IPP、H2O2和Tween‑20。本发明所述试剂盒,相对于只包被3ABC抗体的CLIA和市售常用的ELISA试剂盒相比,具有较高的敏感性、特异性和诊断能力,重复性与稳定性也较好。
精品 G01N33/12
本发明公开了一种基于μ‑calpain活性判断肌肉最佳成熟度的方法,牲畜肉嫩度用肌原纤维小片化指数代表,持水性用加压失水率代表,包括:步骤一、牲畜宰后取多份生肉样品,置于温度2‑6℃下分别成熟不同时间;步骤二、测定成熟不同时间下的各份生肉样品中的μ‑calpain相对活性、肌原纤维小片化指数及加压失水率;步骤三、绘制成熟时间与μ‑calpain相对活性、成熟时间与加压失水率的趋势图,拟合成熟时间与肌原纤维小片化指数的曲线图,并依照成熟时间将三条曲线置于同一个图中,再基于μ‑calpain相对活性值的变化判断出生肉的最佳成熟时间。本发明的方法能高效、精准地判断出猪肉的最佳成熟度,有别于传统方法中依赖经验判别。获得的最佳成熟度的猪肉具有嫩度最佳、保水性适宜等优点。
精品 B65G65/32
本发明公开了一种便更换饲料二次转接料斗装置,包括一次进料管、二次进料管、料斗和阀门总成,一次进料管为至少两个,在一次进料管的下部均设有位置相对应的一次料出料口,与每个一次料出料口对应的一次进料管上固定安装有料斗,在料斗下部设有位于一次料出料口下方的二次料出料口,在二次料出料口处固定安装有与二次料出料口相通的二次进料管,在料斗上安装有能同时关闭和开启一次料出料口的阀门总成。本发明提供的便更换饲料二次转接料斗装置的一次进料管可以做到两条,不同的料线可以根据猪舍的需要输送不同的饲料,料斗可以根据需要控制落料口的启闭,实现分料线按需取料。