精品 C12N5/20
本发明公开了一种识别PCV2病毒样颗粒的单克隆抗体及其在定性及定量检测PCV2病毒样颗粒中的应用。其中，能够特异性识别猪圆环病毒2型病毒样颗粒的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.15793的杂交瘤细胞株分泌产生。通过间接免疫荧光实验鉴定所得到的单克隆抗体3H9的特异性，结果表明该单克隆抗体可以特异性识别PCV2病毒粒子，并且能够与PCV2 VLPs反应，而不与线性cap蛋白包被的ELISA板反应。因此，本发明建立了一种可以同时定性和定量分析PCV2 VLPs的简便方法，解决了PCV2 VLP粒子结构检测仪器昂贵，操作困难以及定量方法不能区分非特异性蛋白和破碎亚基的问题。
精品 C07K14/52
本发明公开了一种广谱型抗菌肽及其应用，属于医药技术领域。所述的抗菌肽，命名为26M，其含有18个氨基酸残基，分子量2475.16道尔顿，等电点12.03，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示。实验证明，该抗菌肽具有显著抑制多种病原菌生长和繁殖的作用，所述的病原菌包括大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、猪链球菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐万古霉素屎肠球菌。本发明提供的一种新型的具有广谱抗菌作用的抗菌肽，能够替代传统抗生素，且不易产生耐药性，在对抗病原菌引起的感染性疾病中将具有很好的应用前景。
精品 C12N15/62
本发明公开了一种猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗及其制备方法和应用。所述的猪口蹄疫病毒O型Fc多肽疫苗中含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经原核表达系统表达得到的可溶性猪口蹄疫病毒O型Fc多肽。本发明通过对已经公开的编码猪口蹄疫病毒O型广谱多表位重组抗原的核苷酸序列进行了密码子优化，然后通过重新构建重组质粒、优化诱导及培养条件，实现了靶标蛋白的可溶性表达及纯化。可溶性蛋白最大程度模拟了天然抗原的特性，免疫原性更强，抗体水平更高。此外，本发明制备得到的疫苗成份更为简单，不含3D蛋白成份，降低了疫苗总蛋白含量，在提高免疫效力的同时降低了疫苗成本。本发明的提出对我国猪O型口蹄疫防控提供了物质储备和技术支撑，具有重要的意义。
精品 C07K19/00
本发明涉及含分子内佐剂的非洲猪瘟病毒重组蛋白、表达载体及应用，属于生物技术制药领域，所述重组蛋白由非洲猪瘟病毒p30和mp54(修饰的p54)与铜绿假单胞菌的外膜蛋白I融合而成。所述的重组蛋白具有通式：OprI‑(Linker)n‑p30‑(Linker)n‑mp54。其中，所述连接肽Linker序列选自GGGGS或GGSGG，优选为GGGGS；n为1、2、3或4，优选为3。实验证明，该重组蛋白能够显著促进树突状细胞的成熟与分化及细胞因子的分泌。利用本发明重组蛋白制备的疫苗免疫动物可激发机体产生产生高水平的中和抗体以及细胞免疫应答，可用于非洲猪瘟病毒诊断试剂、预防或治疗性药物的制备。
精品 C12N5/20
本发明提供了一种杂交瘤细胞株，属于单克隆抗体(MAb)制备技术领域。本发明的杂交瘤细胞株能够分泌类禽型H1N1猪流感病毒HA蛋白MAb，所获得的MAb具有特异性好、效价高等特点。本发明利用上述MAb，结合肽扫描技术，筛选获得了一个位于HA蛋白上的线性抗原表位216VSVGSS221，该表位在类禽型H1N1病毒中高度保守。MAb和抗原表位的获得可用于建立类禽型H1N1 SIV或其抗体的免疫学诊断方法，如ELISA、胶体金等。而表位信息的获得有助于完善H1N1 SIV的HA蛋白表位信息，能够更好的了解HA蛋白抗原结构和功能，为预测病毒抗原性变异的动态，更好的做好疫病的防控提供理论与技术支撑。
精品 C07K16/08
本发明涉及一种抗非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ11及其制备方法。ScFv抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，ScFv抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明从自然感染非洲猪瘟免疫耐过猪的外周血中分离得到淋巴细胞，提取分离淋巴细胞的总mRNA，通过RT‑PCR的方法得到总cDNA片段，以cDNA为模板，在相应的带有Linker接头的引物的作用下，通过SOE‑PCR的方法得到猪源ScFv抗体基因序列，将ScFv抗体基因序列构建至PET‑30a载体，转化BL21（DE3）感受态细胞，筛选得到一个针对于非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ11，对筛选得到的ScFv抗体VH‑VLλ11进行初步活性鉴定发现此抗体具有非洲猪瘟反应活性。本发明的提出为非洲猪瘟的早期诊断与防控提供新的材料，为尽快控制非洲猪瘟的疫情传播提供了新的技术支持。
精品 C07K19/00
本发明提供了一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法，属于功能多肽筛选技术领域。为了克服现有技术的不足，本发明提供一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法，该杂合肽融合了猪源抗菌肽cecropin P1的活性区域和牛源抗菌肽的活性区域的优势获得新型的杂合肽，通过人工合成杂合肽基因并将目的基因连接在质粒pYES2‑ɑ上获得新型杂合肽重组酵母菌株，使用半乳糖诱导其表达，上清液进一步纯化后即可用于食品保鲜，尤其对于新鲜猪肉保鲜和牛奶保鲜具有很好的效果。
精品 C07K14/01
本发明涉及一种非洲猪瘟病毒重组抗原及其应用，属于基因工程技术领域，所述m35重组抗原是通过对非洲猪瘟病毒蛋白p30、p54抗原蛋白预测筛选出的表位串联而成，氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。所述重组抗原m35与阳性猪血清有免疫反应，可作为免疫识别抗原，可用于猪的非洲猪瘟病毒病的诊断，且诊断敏感性好、特异性高、可信度高。
精品 C07K16/08
本发明涉及一种抗非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ6及其制备方法。ScFv抗体VH‑VLλ6的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，ScFv抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明从自然感染非洲猪瘟免疫耐过猪的外周血中分离得到淋巴细胞，提取分离淋巴细胞的总mRNA，通过RT‑PCR的方法得到总cDNA片段，以cDNA为模板，在相应的带有Linker接头的引物的作用下，通过SOE‑PCR的方法得到猪源ScFv抗体基因序列，将ScFv抗体基因序列构建至PET‑30a载体，转化BL21（DE3）感受态细胞，筛选得到一个针对于非洲猪瘟病毒的ScFv抗体VH‑VLλ6，对筛选得到的ScFv抗体VH‑VLλ6进行初步活性鉴定发现此抗体具有非洲猪瘟反应活性。本发明的提出为非洲猪瘟的早期诊断与防控提供新的材料，为尽快控制非洲猪瘟的疫情传播提供了新的技术支持。
精品 A61K48/00
本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域，具体涉及一种OGG1小分子抑制剂用于治疗非洲猪瘟的新用途。首先，本发明意外发现，利用RNA干扰宿主OGG1的表达能够显著降低ASFV结构蛋白p30和p72的mRNA水平和蛋白水平，抑制ASFV的复制和粘附；其次，本发明发现OGG1小分子抑制剂能够显著抑制与ASFV早期表达相关的结构蛋白p30的表达，抑制ASFV的早期感染；同时OGG1小分子抑制剂能够显著抑制与ASFV晚期表达相关的结构蛋白p72的表达，能够显著抑制ASFV的增殖，可用于预防或治疗非洲猪瘟。
精品 C12N15/41
本发明提供一种重组A型口蹄疫病毒VP1基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了塞内卡病毒重组核酸、包含所述重组核酸的塞内卡重组病毒、包含所述塞内卡重组病毒的塞内卡重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明对SVV/FJ/001株基因缺失突变改造，在其cDNA中融合进A型FMDV的VP1基因，得到塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的基因，且表达产物具有良好的反应原性；获得的疫苗株抗原产能高，致病性显著降低甚至对猪无致病性，灭活疫苗免疫动物后不仅能激发SVA的免疫应答，而且能产生针对融合基因的免疫活性，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
精品 C12N15/41
本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒表位基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明获得SVV/FJ/001株全长cDNA，并对其5'UTR进行缺失及突变改造，同时在SVA cDNA中融合进串联的O型FMDV的重组表位基因，构建得到重组口蹄疫抗原表位的塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的口蹄疫B细胞表位和T细胞表位，且表达产物具有良好的反应原性，重组病毒的致病性显著降低甚至对猪无致病性，显著提高了毒株的生物安全性；制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性，在有效激发SVA中和抗体的同时还能产生针对FMDV的特异性抗体，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
粤公网安备44011202003051号