

精品 C07K14/47
本发明公开了属于动物基因工程领域的一种用于诱导猪IGFN1蛋白多克隆抗体的抗原多肽,该抗原多肽由SEQ ID No:1所示的氨基酸序列组成的;其次,本发明公开了由SEQ ID No:2所示的核苷酸序列组成所述抗原多肽的编码基因;此外,本发明还公开了一种猪IGFN1蛋白多克隆抗体。本发明猪IGFN1蛋白多克隆抗体对猪IGFN1蛋白表达水平的检测特异性强,为IGFN1在猪组织中的表达分析及其相关研究提供了重要工具;其次,本发明中的抗原序列长,检测灵敏度高。
精品 C07K16/00
本发明公开了一种猪圆环病毒2型竞争ELISA抗体检测试剂盒。所述试剂盒中包括酶标记的由保藏编号为CGMCC NO.10205的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体。本发明还公开了利用所述单克隆抗体建立的一种检测猪血清PCV2抗体的竞争ELISA方法,该方法先用PCV2阳性血清包被ELISA板以捕获PCV2抗原,然后与待测猪血清抗体及HRP标记的单抗3A5进行反应,通过测定酶标单抗显示竞争ELISA检测结果。该方法与IPMA方法对237份试验猪血清样品进行了平行试验,两种方法检测符合率为94.1%,且该方法的敏感性为92.6%,特异性为98.4%,与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。本发明试剂盒具有操作简便、特异性好和敏感性高等特点,为PCV2流行病学调查及血清抗体检测提供了一种有效技术手段。
精品 A01K5/00
本实用新型公开了一种仔猪饲喂下料装置,包括:主支架,用于为装置其他部分结构提供良好支撑;料筒,通过料筒支架设置于主支架中部,所述料筒两侧还通过辅助支架连接至所述主支架;所述料筒底部开放,设置有料筒下开口;内套筒,中空且上表面封闭、下表面开放,设置于所述料筒下开口下方;外套筒,中空且上下表面均开放,套装于所述内套筒外部,与所述内套筒之间留有供饲料漏下的空隙;分料机构,设置于所述内套筒上表面与所述料筒下开口之间;当所述分料机构启动时,带动料筒下开口处饲料移动,从内套筒与外套筒之间的空隙漏下;注水机构,设置于所述内套筒内,启动时朝向下方注水;料槽,设置于所述主支架下部,位于所述内套筒和外套筒下方。
精品 C12N15/11
本发明提供了猪H11位点的DNA片段及其应用。上述的猪H11位点的DNA片段的序列如序列表中的序列1所示,该位点可用于构建猪定点突变库。在该位点插入基因安全性高,无基因沉默效应,具有广谱的细胞表达活性。在猪的基因组中定位H11这样安全有效的基因修饰位点,通过在细胞或个体水平上对猪H11基因进行敲除或修饰,以构建猪H11基因突变库,可为培育优良品系的猪提供前期技术支持。
精品 C12Q1/70
本发明公开一种可同时用于口蹄疫(A型、O型和Asia 1型)、猪水泡病和水疱性口炎检测的引物、由这些引物构成的试剂盒和制备方法,以及这种试剂盒非疾病诊断目的的使用方法。本发明的用于检测口蹄疫A型、O型和Asia 1型病毒的引物基因序列共10条,试剂盒中除主十条引物外还包括2条通用引物。相关实验表明本发明的敏感性高于普通荧光定量PCR技术,与荧光定量PCR相比可大大的节省时间,可以避免非特异性产物的扩增,同时有效地避免了引物的偏好向现象,提高了检测的灵敏性。
精品 C07K14/195
本发明提供了六对特异识别猪H11位点的多肽及其编码基因和应用。本发明提供的六对多肽均由多肽甲和多肽乙组成,所述多肽甲和多肽乙均由18个TAL核酸识别单元组成,每个TAL核酸识别单元中具有两个重复序列可变的双氨基酸残基;本发明提供的多肽对能在细胞或个体水平上对猪H11基因进行敲除或修饰,以解析猪H11基因的功能、构建猪H11基因突变库,为培育优良品系的猪提供前期技术支持,为转基因猪的制备提供了稳定的平台。
精品 C12N15/11
本发明提供了特异识别猪H11位点的sgRNA及其编码DNA和应用,该sgRNA序列包括识别染色体上特定的DNA序列片段和骨架RNA片段,识别染色体上特定的DNA序列片段的核苷酸序列如下1)或2):1)序列表中的序列1或序列2所示的核苷酸序列;2)将所述1)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与1)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列。本发明所提供的sgRNA能高效的识别猪的H11位点,并借助Cas9酶对该位点进行高效的定点切割,其为后面的针对猪H11位点高效定点整合实验打下了坚实的基础。
精品 C12N15/113
本发明提供了一对特异识别猪H11位点的sgRNA及其编码DNA和应用,该sgRNA对由sgRNA‑F和sgRNA‑R组成,sgRNA‑L的核苷酸序列如下1)或2):1)序列表中的序列1所示的核苷酸序列;2)将所述1)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与1)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列;sgRNA‑R的核苷酸序列如下3)或4):3)序列表中的序列2所示的核苷酸序列;4)将所述3)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与3)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列。本发明能大大增加外源基因定点插入的效率,为转基因猪的制备提供了稳定的平台。
精品 C12N5/20
本发明公开了一种猪圆环病毒2型抗原捕获ELISA试剂盒。所述试剂盒中包括酶标记的由保藏编号为CGMCC NO.10205的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体。本发明还公开了利用所述单克隆抗体建立的一种快速检测猪圆环病毒2型的捕获ELISA方法,其以抗猪圆环病毒2型多抗和抗猪圆环病毒2型Cap蛋白的单抗分别作为捕获抗体和检测抗体。该方法可以检测多种基因型PCV2毒株,检测敏感性为400TCID50/ml,与其它常见猪病毒无交叉反应,且与毒价测定方法符合率为88%。结果表明,该方法具有操作简单,特异性好,敏感性高,耗时短等优点,可以用于估测病毒毒价,方便快捷地控制PCV2灭活疫苗半成品的质量。
精品 C12N15/11
本发明提供了一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法,该包括以下步骤:1)设计被敲除基因的5’端同源臂和3’端同源臂以及相应的通用引物;2)将上述同源臂、通用引物和欲插入的基因引入到载体中,得到打靶载体;3)转染细胞;4)PCR扩增鉴定插入结果。本发明主要是依托猪H11位点切割系统设计打靶载体,该载体它能够将外源基因精确的引入到猪的H11位点中,以解决传统打靶技术效率低下,PCR检测引物不便设计,检测难度大的问题。本发明提供的定点插入方法能让外源基因稳定在H11表达,为猪转基因搭建了稳定的平台。
精品 C12N7/01
本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株,该疫苗株包含猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的基因组核酸,在该HuN4‑F112基因组的ORF1b和ORF2a之间插入有GM‑CSF序列,该GM‑CSF序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。本发明还公开了一种上述猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株的制备方法和应用。本发明的猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株,不仅能够稳定表达GM‑CSF,具有遗传稳定性,而且该重组表达GM‑CSF的PRRSV弱毒疫苗株,可促使DC细胞活化和成熟,进而增强APC的抗原呈递能力,明显提高PRRSV弱毒疫苗的细胞免疫水平。
精品 C12Q1/70
本发明公开了一种用于检测猪圆环病毒的Taqman Real‑time PCR试剂盒,包含扩增预混液、阴性对照、阳性对照以及序列SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:2的扩增引物及SEQ ID NO:3的探针引物的混合物。本发明在PCR的基础上,使用了探针法,只有当探针引物特异的结合到扩增靶序列上并且PCR上游引物在有效延伸时,报告荧光基团和猝灭荧光基团分离,从而荧光检测系统才能接收到荧光信号,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步;且该反应始终都是闭管的实时检测可以有效防止反应产物的污染,与普通PCR方法相比具有更高的准确性,有助于猪圆环病毒的防控和隐性带毒动物的剔除。